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薄層色譜儀的基本操作方式是什么

時間:2015-03-12

薄層色譜儀廣泛應用于科研與生產領域,對于首次接觸的使用者,我們來介紹下薄層色譜儀的基本操作方式是什么。
 
(1) 薄層色譜儀薄層板制備除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合, 去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩地移動薄層色譜儀涂布器進行涂布(厚度為0.2~ 0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置 有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。 

 
(2)點樣除另有規定外,用薄層色譜儀點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底 邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。 
 
(3)展開展開缸如需預先用展開劑飽和,可在薄層色譜儀缸中加入足夠量的展開劑,并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封薄層色譜 儀缸頂的蓋,使系統平衡或 按正文規定操作。 將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5 ~1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中),密封缸蓋,待展開至規定距離(一般為10~15cm), 取出薄層板,晾干,按各品種項下的規定檢測。 
 
(4)如需用薄層色譜儀的薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層色譜儀薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法,除另有規定外,可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明, 結合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層色譜儀的薄層掃描結果的因素很多,故應在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內呈線性 的情況下,將供試品與 對照品在同一塊薄層上展開后掃描,進行比較并計算定量,以減少誤差。各種供試品, 只有得到分離度和重現性好的薄層色譜,才能獲得滿意的結果。
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